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年，美国学者KennethKinzler与BertVogelstein首次提出了“数字PCR”的概念，该技术实现了核酸拷贝数绝对定量的突破。数字PCR在技术上已趋近完全成熟，未来在数字PCR耗材成本进一步降低并实现操作智能化后，数字PCR将在临床诊断与治疗、微生物检测和食品安全检测等方面拥有更广阔的应用前景。数字PCR在单分子层面上的绝对定量，可以彻底摆脱对标准曲线的依赖而直接给出靶序列的拷贝数，提高了实验结果在批内和批间的稳定性，甚至能用来对标准品进行定标。基于绝对定量的方式，数字PCR结果的高重复性和高精度可实现微小差异的基因表达分析。
本项目是基于微液滴数字PCR技术的肿瘤分子诊断试剂开发及产业化，产品可应用于非小细胞肺癌肿瘤活检，使用无创或者微创方式采集外周血进行检测，检测方法灵敏度高，高于传统RealTimePCR10倍以上，具有绝对定量的优势，且研发的通用PCR试剂具有兼容性，不仅仅依赖于某一厂家生产的仪器设备，具有占领市场的优势。由于检测灵敏度高和绝对定量的优势，项目产品可以广泛的推广和使用。
本项目已有的技术基础，以非小细胞肺癌的EGFR基因和KRAS基因检测试剂盒为例，应用数字PCR技术定量检测血浆EGFR和KRAS基因的主要突变位点，研发基于微液滴数字PCR的非小细胞肺癌无创多重突变检测试剂盒并达到产业化应用，通过与组织EGFR基因突变检测结果（ARMS）对比，确定微液滴PCR在无创检测非小细胞肺癌突变时的灵敏度和特异性，以及定量的准确性。
本项目使用的关键技术是微滴式数字PCR，其原理在于：微滴式数字PCR系统在传统的PCR扩增前对样品进行微滴化处理，即将含有核酸分子的反应体系分成成千上万个纳升级的微滴，其中每个微滴或不含待检核酸靶分子，或者含有一个至数个待检核酸靶分子。经PCR扩增后，逐个对每个微滴进行检测，有荧光信号的微滴判读为1，没有荧光信号的微滴判读为0，根据泊松分布原理及阳性微滴的个数与比例即可得出靶分子的起始拷贝数或浓度。
目前癌症患者的基因检测标本的主要来源是肿瘤手术病理切片或活检样本，这些样本获取困难，对肿瘤患者有侵入性甚至还会有一定的风险，而且活检病理很难跟踪疾病进程，而肿瘤的发生发展是一个动态的过程。液体活检采集方便、数据样本更为准确，被认为是市场上最为可靠的个体化诊疗标本，同时是诊疗检测未来发展的核心。
项目技术创新点在于运用液体活检技术，通过血浆ctDNA检测非小细胞肺癌EGFR和KRAS基因突变，具有以下优点：
（1）微创、便捷并且价格实惠；
（2）可多次取材、做动态观察；
（3）反映肿瘤异质性，适合检测肿瘤基因突变。
本项目技术与已获批的基于荧光定量平台的试剂盒技术相比，具有相当大的优势，主要包括：
（1）灵敏度高，比传统RealTimePCR方法灵敏度提高10倍以上；
（2）定量精准，直接计数目标分子数而不依赖任何校准物或外标，通过单分子DNA的绝对定量，把对血液中非小细胞肺癌检测的准确度提升至0.01%的水平；
（3）检测线性范围宽、特异性好。
综上所述，项目产品针对非小细胞肺癌等肿瘤患者进行检测，目标客户明确，产品定位清晰，国内同类产品少，处于领先地位。一旦推向市场，必能迅速打开局面，取得良好的收益。
如欲详细了解，请与我们联系。谢谢！
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